CHAPTER ONE                                                                                                                     1 

1.1       Introduction                                                                                                                1 

1.2       Aim and Objective of the Study                                                                                 4 

1.2.1    Aim of the Study                                                                                                        4 

1.2.2    Objectives of the Study                                                                                              4 

1.3       Significance of the Study                                                                                           4 

CHAPTER TWO                                                                                                                    5 

2.1       Lipases                                                                                                                        5 

2.2       Sources of Lipases                                                                                                      9 

2.3       Microbial Lipases                                                                                                       9 

2.3.1    Fungi as Source of Lipase                                                                                          12 

2.3.2    Lipase assay for fungal culture                                                                                   13 

2.4       Isolation of lipase-producing microorganisms                                                           14 

2.5       Lipases Production                                                                                                     15 

2.6       Applications of Lipases                                                                                              16 

2.6.1    Food, Fat and oil Industry                                                                                          17 

2.6.2    Dairy Industry                                                                                                             18 

2.6.3    Bakery Industry                                                                                                          19 

2.6.4    Lipases in the detergents                                                                                            19 

2.6.5    Lipases in pulp and paper industry                                                                             20 

2.6.6    Lipases in cosmetics and perfumery                                                                          20 

2.6.7    Lipases in leather industry                                                                                          21 

2.6.8    Lipases in bioremediation                                                                                          21 

2.6.9    Lipases as biosensors                                                                                                  22 

2.7       Methods for the Screening of Lipase Producing Microorganisms                                  20 

2.7.1    Qualitative Methods                                                                                                   22 

2.7.1.1 Gel Diffusion assay using different substrates (lipidic)                                             23 

2.7.1.2 Gel Diffusion assay with indicator dyes                                                                     25 

2.7.2    Quantitative Methods                                                                                                 25 

2.7.2.1 Titrimetric Methods                                                                                                    26 

2.7.2.2 Colorimetric Methods                                                                                                 26 

2.7.2.3 Colorimetric methods using p-nitrophenyl esters                                                      26 

2.7.2.4 Radial diffusion method                                                                                             27 

2.7.2.5  Fluorescence assay                                                                                                     27 

2.7.2.6 Chromatographic methods                                                                                         28 

CHAPTER THREE: Materials and Methods                                                                         29 

3.1       Media Used                                                                                                                 29 

3.2       Collection of Samples                                                                                                29 

3.3       Characterization of Lipase Producing Organisms                                                      29 

3.4       Screening of lipolytic fungal species                                                                          30 

CHAPTER FOUR: Results                                                                                                    31 

CHAPTER FIVE                                                                                                                    42 

5.1       Discussion                                                                                                                   42 

5.2       Conclusion                                                                                                                  45 

References                                                                                                                              46 

LIST OF TABLES 

Tables             Title                                                                                                    Pages 

4.1       Lipolytic Organism from the Environment                                                    32 

4.2       Frequency and Percentage of Isolated Organisms from the Environment   41 

LIST OF FIGURES 

Figures           Title                                                                                                    Pages 

4.1A    Macroscopic Appearance of Aspergilus niger                                                           33 

4.1B    Microscopic Appearance of Aspergillus niger                                                           34 

4.2A    Microscopic Appearance of Aspergillus carbonarius                                                35 

4.2B    Macroscopic Appearance of Aspergillus carbonarius                                               36 

4.3A    Macroscopic Appearance of Aspergillus flavus                                                         37 

4.3B    Microscopic Appearance of Aspergillus flavus                                                          38 

4.4A    Macroscopic Appearance of Aspergillus viscolor                                                      39 

4.4B    Microscopic Appearance of Aspergillus viscolor                                                      40 

Lipolytic enzymes are currently attracting significant attention because of their biotechnological potential. Most of the lipases used in industry are microbial enzymes, of both fungal and bacterial origin. The present study deal with isolation and characterization of lypolytic fungi from the atmosphere. Prepared Rhodamine B and Tributyrin agar were exposed to the atmosphere in the Microbiology Laboratory of Olabisi Onabanjo University for 15 - 30 minutes. Screening of lipase producing fungi was isolated using Rodamine B and tributyrin as a substrate on agar plates. A total of nine (9) lipolytic organisms was recovered from the environment. The isolated organisms includes Aspergillus niger, Aspergillus carbonarius, Abisidia spp., Aspergillus flavus, Aspergillus niger had the highest percentage with 4(44.5%), followed by Apsergillus flavus and Absida spp. with 2(22%) and 2(22%) respectively. The result of this study showed that lipase activity microorganisms can be isolated by exposing rhodamine B agar and tributyrine agar to the air. Lipases are ubiquitous enzymes of considerable physiological significance and industrial potential. So studies to analyze the production of the enzyme from microbial source are essential from the research, environmental and commercial point of view. 

Keyword: Lipolytic fungi, Lipolytic enzymes, biotechnological potential